酶底物法是近些年來(lái)興起的水中菌群檢測(cè)方法，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果易判斷，適用于快速檢測(cè)。但有不少用戶對(duì)此種方法存在懷疑，不知道這種方法出來(lái)的檢測(cè)結(jié)果是否科學(xué)準(zhǔn)確，下面西安海研生物就用酶底物法程控定量封口機(jī)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)檢測(cè)對(duì)比。

1、材料與試劑

海研生物定量盤(pán)、lmL移液管或移液槍、10mL移液管或移液槍、培養(yǎng)箱(35±1)、6瓦366FIITI紫外燈、紫外燈箱(23cmx30onx17on1)、無(wú)菌水。

2、、方法步驟

(1)首先向100mL裝有固體培養(yǎng)基的瓶中加入無(wú)菌水至刻度，搖勻，制成液體培養(yǎng)基，然后放置在冰箱中保存，使用有效期為5天。見(jiàn)圖1。

(2)取1mL水樣及9mL液體培養(yǎng)基倒入立科定量盤(pán)中。見(jiàn)圖2。

(3)將定量盤(pán)蓋好，在水平桌面上旋動(dòng)將所有水樣分配到定量盤(pán)的孔中(孔中的氣泡不會(huì)影響結(jié)果)。見(jiàn)圖3。

(4)將定量盤(pán)豎起呈垂直90度，將多余的水樣由盤(pán)內(nèi)海綿吸收。見(jiàn)圖4。

(5)將定量盤(pán)緩慢翻轉(zhuǎn)過(guò)來(lái)，于培養(yǎng)箱中(35±0.5)培養(yǎng)48h(若結(jié)果為可疑陽(yáng)性則延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間至72h)。見(jiàn)圖5。

(6)計(jì)數(shù)：培養(yǎng)完成后將培養(yǎng)盤(pán)蓋打開(kāi)，用紫外燈在定量盤(pán)上方13on處照射，數(shù)顯熒光的孔數(shù)。對(duì)照MPN表得出結(jié)果。注意：海綿條顯熒光不必記錄在讀數(shù)范圍內(nèi)。由于本方法的*大檢測(cè)上限為738MPN/mL，如需稀釋時(shí)，將結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)即為報(bào)告讀數(shù)(如稀釋l0倍時(shí)的操作為：加入0.1mL樣品和9.9mL液體培養(yǎng)基)。